傳染源:感染牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒的!腥九:桶l(fā)病牛的皮膚結(jié)節(jié)、唾液、精液等含有病毒。
傳播途徑:主要通過(guò)吸血昆蟲(chóng)(蚊、蠅、蠓、虻、蜱等)叮咬傳播?赏ㄟ^(guò)相互舔舐傳播,攝入被污染的飼料和飲水也會(huì)感染該病,共用污染的針頭也會(huì)導(dǎo)致在群內(nèi)傳播。感染公牛的精液中帶有病毒,可通過(guò)自然交配或人工授精傳播。
易感動(dòng)物:各品種牛在未免疫前均易感,無(wú)年齡差異。
潛伏期:實(shí)驗(yàn)室條件下常見(jiàn)4-14天,WOAH規(guī)定潛伏期為28天。
發(fā)病率和死亡率:感染后發(fā)病率高(5%~45%),死亡率低(5%~20%)。
主要發(fā)病季節(jié):主要發(fā)病于吸血蟲(chóng)媒活躍季節(jié)。
臨床癥狀
牛結(jié)節(jié)性皮膚病的潛伏期一般為9~21天,有時(shí)長(zhǎng)達(dá)28天。發(fā)病后臨床癥狀與發(fā)生程度有所差異,與牛只品種、年齡、健康狀況及病毒感染量有關(guān)。有些病牛發(fā)病后體溫可升高至41℃以上,持續(xù)數(shù)天,食欲不振或廢絕。皮膚表面出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或小*,隨后發(fā)展成直徑2~4
cm的堅(jiān)實(shí)、圓形皮膚結(jié)節(jié),出現(xiàn)在頭頸、四肢、乳房、外陰等部位,隨后結(jié)節(jié)逐漸增大、壞死、纖維化,有時(shí)會(huì)自動(dòng)消退;破潰后可能形成潰瘍,不易愈合。肩前淋巴結(jié)明顯腫大;四肢、腹部、會(huì)陰等部位可能水腫。公牛暫時(shí)或*性不育,懷孕母牛流產(chǎn)或發(fā)情延遲,奶牛產(chǎn)奶量顯著下降。
解剖病死?梢(jiàn)皮膚病變顯著,皮下出現(xiàn)堅(jiān)硬結(jié)節(jié),直徑從幾毫米到幾厘米不等,質(zhì)地堅(jiān)硬,可能有痛感[1]。結(jié)節(jié)可能破潰形成潰瘍,周圍皮膚可能出現(xiàn)炎癥反應(yīng)、*和熱痛。在皮膚結(jié)節(jié)和潰瘍中可以發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。病牛淋巴結(jié)腫大,尤其是肩前、腹股溝外、股前、后肢和耳下;淋巴結(jié)切面可能顯示中心壞死,周圍有炎癥反應(yīng)。有些病死牛的心、肝、脾等內(nèi)臟器官也可能出現(xiàn)結(jié)節(jié)或斑點(diǎn),表現(xiàn)出不同程度的炎癥。
鑒別診斷
需與偽牛痘、牛*性口炎、牛皰疹病毒病、牛痘、貝諾孢子蟲(chóng)病等區(qū)分,重點(diǎn)依據(jù)病毒特性、傳播途徑和病理變化:
偽牛痘:結(jié)節(jié)較小(0.1-0.5cm),多見(jiàn)于乳房和乳頭,無(wú)全身癥狀。
牛*性口炎:結(jié)節(jié)集中于口鼻周圍,無(wú)發(fā)熱和淋巴結(jié)腫大。
牛皰疹病毒。嚎谇粷?yōu)橹,皮膚結(jié)節(jié)少見(jiàn)。
實(shí)驗(yàn)室診斷
病毒分離與鑒定:
采集病牛皮膚結(jié)節(jié)、血液或唾液,接種敏感細(xì)胞(如Vero細(xì)胞)培養(yǎng),觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)。
結(jié)合電鏡觀察病毒形態(tài)或PCR檢測(cè)病毒核酸確認(rèn)。
分子生物學(xué)檢測(cè):
PCR/實(shí)時(shí)熒光定量PCR:針對(duì)LSDV的P32、GPCR等基因設(shè)計(jì)引物,快速檢測(cè)病毒核酸,靈敏度高。
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP):適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),1小時(shí)內(nèi)出結(jié)果。
血清學(xué)檢測(cè):
病毒中和試驗(yàn)(VNT):檢測(cè)血清中中和抗體,確認(rèn)感染或免疫狀態(tài)。
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):檢測(cè)IgG或IgM抗體,適用于大規(guī)模篩查。
間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA):用于病毒抗原定位或抗體檢測(cè)。
病理組織學(xué)檢測(cè):
取皮膚結(jié)節(jié)或內(nèi)臟組織,制作石蠟切片,觀察細(xì)胞內(nèi)嗜酸性包涵體(確診依據(jù)之一)。
膠體金快速檢測(cè)卡
牛結(jié)節(jié)皮膚病抗體快速檢測(cè)卡基于膠體金免疫層析試驗(yàn)(GICA)原理,通過(guò)檢測(cè)牛血清或全血中的抗體來(lái)判斷是否感染病毒。樣本加入加樣孔后,與膠體金標(biāo)記物沿層析膜移動(dòng)。若樣本中存在抗體,會(huì)與檢測(cè)線上的抗原結(jié)合顯示紫紅色;若無(wú)抗體,則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。這種檢測(cè)方式能快速識(shí)別感染牛群,為防控提供科學(xué)依據(jù)。
快速篩查與早期發(fā)現(xiàn)
檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)便,無(wú)需專業(yè)設(shè)備,10-15分鐘即可出結(jié)果,適合現(xiàn)場(chǎng)快速篩查。早期發(fā)現(xiàn)感染牛群可及時(shí)采取隔離、治療等措施,阻斷病毒傳播鏈,防止疫情擴(kuò)散。
輔助診斷與鑒別
在診斷不明時(shí),檢測(cè)卡可作為輔助工具,結(jié)合臨床癥狀和其他檢測(cè)方法(如PCR、ELISA)提高診斷準(zhǔn)確性。例如,當(dāng)牛出現(xiàn)皮膚結(jié)節(jié)、發(fā)熱等癥狀時(shí),檢測(cè)卡可快速判斷是否為牛結(jié)節(jié)皮膚病感染。
提高防控效率
檢測(cè)卡的高靈敏度和特異性(使用針對(duì)病毒特定抗原的識(shí)別技術(shù))能降低假陽(yáng)性或假陰性率,確保結(jié)果可靠。這有助于養(yǎng)殖戶和獸醫(yī)快速?zèng)Q策,減少因誤診導(dǎo)致的防控延誤。
防控措施
牛結(jié)節(jié)皮膚病的防控需堅(jiān)持“預(yù)防為主、綜合治理”原則,通過(guò)疫苗接種、生物安全、疫情處置和長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)構(gòu)建防控體系。
養(yǎng)殖戶需落實(shí)生物安全管理措施,堅(jiān)持每周進(jìn)行1次常規(guī)消毒,推薦使用10%生石灰乳、2%漂白粉溶液、2%過(guò)氧化氫、2%氫氧化鈉等。避免蚊蟲(chóng)、牛虻等吸血昆蟲(chóng)滋生可以使用蚊虻螨太保等藥物在夏季定期噴灑在圈舍及牛身上,以減少蚊蟲(chóng)叮咬。
定期監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)疑似病例立即隔離,檢測(cè)為陽(yáng)性的牛嚴(yán)格撲殺并無(wú)害化處理。從外面購(gòu)進(jìn)牛只時(shí)應(yīng)按規(guī)定嚴(yán)格檢疫,避免引入牛結(jié)節(jié)性皮膚病感染牛。嚴(yán)格遵守國(guó)家及屬地獸醫(yī)部門(mén)動(dòng)物防疫的相關(guān)法律法規(guī),配合政府開(kāi)展疫病防控工作。